Diagnóstico presuntivo de dengue en pacientes con fiebre y serología reactiva ingresados en un hospital pediátrico / Presumptive diagnosis of dengue in patients with fever and reactive serology admitted in a pediatric hospital

Se realizó un estudio descriptivo transversal de 1 819 pacientes con fiebre y serología reactiva, ingresados en el Hospital Infantil Dr Antonio María Béguez César de Santiago de Cuba por diagnóstico presuntivo de dengue, desde enero de 2015 hasta diciembre de 2016, de quienes se extrajeron muestras de suero en el Departamento de Microbiología de la mencionada institución, las cuales fueron enviadas al laboratorio del Instituto de Medicina Tropical Dr Pedro Kourí de La Habana para su procesamiento y posible confirmación. En la casuística se obtuvo una positividad de 54,3 por ciento, así como predominio de los niños mayores de 5 años con 1 451, de los procedentes del municipio de Santiago de Cuba con 1 651, de la fiebre en 847 y de la ocurrencia de la infección durante el trimestre octubre-noviembre en 864.

A descriptive cross-sectional study of 1 819 patients with fever and reactive serology, admitted in Dr Antonio María Béguez Caesar Pediatric Hospital in Santiago de Cuba was carried out through presumptive diagnosis of dengue from January, 2015 to December, 2016, from whom samples of serum were obtained in the Microbiology Department of the above-mentioned institution, which were sent to the laboratory of Dr Pedro Kourí Tropical Medicine Institute in Havana for their processing and possible confirmation. A 54,3 percent of positive cases was obtained in the case material, as well as the prevalence of children older than 5 years with 1 451, those coming from Santiago de Cuba municipality were 1 651, those with fever were 847 and those with occurrence of the infection during the trimester October-November were 864.

Presença de aglutininas anti-Leptospirasppem bovinos abatidos em frigorífico no extremo sul do estado da Bahia e fatores de risco associados / Presence of agglutinins anti-Leptospira in slaughtered bovine in the extreme south of Bahia and risk factors

INTRODUÇÃO: A bovinocultura no Brasil é uma das principais atividades que compõem o agronegócio do país, sendo o segundo maior rebanho do mundo. O estado da Bahia tem papel importante neste setor, sendo o 10º estado em número de animais abatidos no Brasil em 2015 (4,4% dos animais abatidos no Brasil). Mesmo com índices animadores, a produtividade da pecuária baiana ainda é baixa, tendo as doenças infecciosas e parasitárias como principais entraves à sua melhora. Dentre essas doenças a leptospirose apresenta uma prevalência de 45,42% nos bovinos no estado da Bahia em prévio inquérito. OBJETIVOS: Assim, o presente projeto teve como objetivo: i) analisar a sororeatividade contra Leptospira de bovinos abatidos em estabelecimento com serviço de inspeção federal, no estado da Bahia, utilizando o teste microaglutinação (MAT), ii) avaliar qual o sorovar predominante na população animal pesquisada, iii) avaliar os rins dos animais abatidos em estabelecimento com serviço de inspeção federal, no estado da Bahia quanto a presença de lesões macroscópicas e a sua associação com as reações positivas ao MAT, vi) avaliar possíveis fatores de risco que poderão propiciar o desencadeamento da infecção por Leptospira. Foram analisados soros de 400 bovinos abatidos...

INTRODUCTION: cattle raising in Brazil is one of the activities that comprise the agribusiness of the country, the second largest herd in the world. The state of Bahia has an important role in this sector, being the 10th state in the number of animals slaughtered in Brazil in 2015 (4.4% of the animals slaughtered in Brazil). Despite encouraging rates, productivity of the Bahian livestock is still low, and infectious and parasitic diseases as major barriers to improvement. Among these diseases leptospirosis has a prevalence of 45.42% in cattle in the state of Bahia in a previous survey. OBJECTIVES: The present project aimed to: i) analyze the seroreactivity against Leptospira from bovine animals slaughtered in establishments with federal inspection service in the state of Bahia, using the microscopic agglutination test (MAT), ii) assess what the predominant serovar in animal population studied, iii) evaluate the kidneys of animals slaughtered in an establishment with federal inspection service in the state of Bahia and the presence of gross lesions and their association with the positive reactions to the MAT, vi) evaluate possible risk factors that may promote the onset of Leptospira infection. 400 slaughtered cattle sera were analyzed...

Revisão sistemática dos métodos sorológicos utilizados em gestantes nos programas de triagem diagnóstica pré-natal da toxoplasmose / Systematic review of serological methods used in prenatal screening of toxoplasmosis in pregnant women

Informações sobre a melhor estratégia para triagem sorológica da toxoplasmose em gestantes são escassas e poucos estudos mencionam o uso de amostras de sangue capilar. Realizou-se uma revisão sistemática para pesquisar os métodos sorológicos empregados em programas de triagem pré-natal da toxoplasmose no mundo e as características principais destes programas, com busca nas bases de dados PUBMED e LILACS. Foram selecionados artigos referentes a programas de triagem sorológica pré-natal da toxoplasmose que descrevessem a amostra (sangue capilar ou soro) e o teste sorológico utilizado. Foram encontrados 1554 trabalhos no PUBMED e 242 na LILACS, sendo 58 em duplicata. Foram analisados 47 artigos finais. Os testes sorológicos de triagem citados com maior frequência foram os imunoenzimáticos para detecção de IgG (19 ou 40,4%) e IgM (18 ou 38,3%) e, entre os testes confirmatórios, o mais utilizado foi o teste de avidez de IgG (14 ou 29,8%). Todos os estudos analisados utilizaram amostras de soro para a triagem pré-natal da toxoplasmose.

The best strategy for toxoplasmosis serological screening in pregnant women is not completely defined and few studies mention the use of capillary blood samples. A systematic review of the literature was conducted to investigate the serological methods used in prenatal screening programs of toxoplasmosis in the world and the main features of these programs, with search in PubMed and LILACS databases. We selected articles that described their serological prenatal screening programs, with mention of the sample (capillary blood or serum) and of the serological tests used. We found 1554 articles in PubMed database and 242 articles in LILACS, with 58 duplicates. 47 final articles were analyzed. The serological screening tests most frequently cited were immunoassays for the detection of IgG (19, 40.4%) and IgM (18, 38.3%) and between confirmatory tests, the most used was IgG avidity test (14, 29.8%). All analyzed studies used serum samples for toxoplasmosis prenatal screening. There is need for studies assessing and testing different samples in longitudinal studies.

Concordancia entre los métodos del diagnóstico micológico de la paracoccidioidomicosis / Concordance between methods of mycological diagnosis of paracoccidioidomycosis

La paracoccidioidomicosis (PCM) es una enfermedad crónica, sistémica, granulomatosa, endémica en nuestro país, producida por un hongo dimorfo denominado Paracoccidioides brasiliensis. Existen numerosas técnicas para realizar el diagnóstico de esta entidad. Nos planteamos la posibilidad de realizar un estudio para determinar la concordancia que pudiese existir entre las diferentes técnicas que se utilizan para el diagnóstico de la PCM. Se realizó un registro de historias clínicas. Se evaluaron 251 historias clínicas de pacientes con diagnóstico de PCM, de la consulta externa de la Sección de Micología Médica “Dr. Dante Borelli” del IMT-UCV, entre los años 2000 y 2010. Se determinó la concordancia entre los métodos diagnósticos por medio del análisis de concordancia de atributos para datos binarios. Entre el examen directo y el cultivo, no hubo acuerdo. Entre la serología y el examen directo, se encontró que hubo equivalencia, así como entre el cultivo y la serología. No se pudo calcular correlación alguna con la histopatología, ya que no hubo datos negativos, en vista de que todas las muestras procesadas fueron positivas. El diagnóstico de la PCM se basa en la identificación y el aislamiento del hongo. Es obligatoria la realización del examen directo en fresco de toda muestra clínica. Nuestro estudio de muestra que deben realizarse todos los métodos que estén al alcance (examen directo en fresco, cultivo, serología, histopatología) a fin de aumentar la probabilidad de llegar a un diagnóstico certero de esta patología

Paracoccidioidomycosis (PCM) is a chronic, granulomatous disease, endemic in our country, produced by a dimorphic fungus, Paracoccidioides brasiliensis. Several techniques are used for the diagnosis. A study was performed to determine the agreement that could exist between the different techniques, used for the diagnosis of PCM. Clinical records of patients with diagnosis of PCM was made. 251 clinical records were reviewed, from the Sección de Micología Médica “Dr. Dante Borelli”, IMT- UCV, between 2000 and 2010. The agreement between the methods was determined by means of the analysis of agreement of attributes for binary data. Between direct examination and culture, there was no agreement. Between serology and direct examination, there was equivalence, as well as between culture and serology. Correlation could not be calculated with histopathology, since there were no negative data, due to the fact that all the processed samples were positive. The diagnosis of the PCM is based on the identification and isolation of the fungus. Direct examination is mandatory in all clinical samples. Our study demonstrates that all the methods must be performed (direct examination, culture, serology, histopathology) in order to increase the probability of reaching an accurate diagnosis

Leptospira spp. infection in sheep herds in southeast Brazil

With the aim of studying Leptospira spp. infection in sheep herds, blood samples and respective kidney and liver fragments were collected from 100 animals from twenty different properties during slaughter at a meat company in the Sorocaba region, São Paulo state, southeast Brazil. The microscopic agglutination test (MAT) was performed with 29 strains of Leptospira spp. To identify the agent in the liver and kidney, 100 samples of each tissue were submitted to culture in Fletcher medium and analyzed by the polymerase chain reaction (PCR) for Leptospira spp.

Leptospira spp. infection in sheep herds in southeast Brazil

With the aim of studying Leptospira spp. infection in sheep herds, blood samples and respective kidney and liver fragments were collected from 100 animals from twenty different properties during slaughter at a meat company in the Sorocaba region, São Paulo state, southeast Brazil. The microscopic agglutination test (MAT) was performed with 29 strains of Leptospira spp. To identify the agent in the liver and kidney, 100 samples of each tissue were submitted to culture in Fletcher medium and analyzed by the polymerase chain reaction (PCR) for Leptospira spp.

Aspecto clínico-epidemiológicos e imunológicos da hanseníase em área heperendêmica do estado do Maranhão / epidemiological and immunological aspect of leprosy in hyperendemic area of the state of Maranhão

A hanseníase ou mal de Hansen (MH), causada pelo patógeno Mycobacterium leprae, ainda constitui um problema de saúde pública no Brasil, e em especial no Maranhão. A doença é hiperendêmica em 77 municípios do Estado. A resposta imune ao patógeno de indivíduos dessas regiões permanece obscuro podendo contribuir na manutenção da hiperendemia. Por isso, este estudo teve por objetivo caracterizar o perfil clínico-epidemiológico e imunológico de pacientes infectados por M. leprae, e de seus contatos, procedentes de área hiperendêmica. Para o desenvolvimento deste trabalho foi realizado um estudo transversal foi realizado nos municípios de Açailândia, Imperatriz e São Luís, no período 2009 a 2012. Pacientes e contatos foram clinicamente avaliados e tiveram os dados epidemiológicos coletados. Uma amostra de sangue foi obtida para realização das sorologias para detecção de anticorpos IgM anti-PGL1 pelos testes de ELISA e ML-Flow, e dosagem de citocinas e quimiocinas. A análise descritiva demonstrou que a maioria dos pacientes eram adultos, do gênero masculino, diagnosticados principalmente com as formas intermediárias da doença (60%)...

Leprosy, caused by the pathogen Mycobacterium leprae, it is a public health problem in Brazil yet, especially in Maranhão. The disease is hyperendemic in 77 counties of the State. Immune response to the pathogen of individuals in these regions remains unclear and may be contributing to maintenance of high endemicity. Therefore, this study aimed to characterize epidemiological and immunological profile of patients infected with M. leprae, and their contacts, from hyperendemic regions. Cross-sectional study was accomplished in Açailândia, Imperatriz and São Luís counties, 2009-2012. Patients and contacts were clinically evaluated and had their epidemiological data collected. A blood sample was obtained for performing serological tests IgM anti-PGL1 detection by ELISA and ML-Flow and measurement of cytokines and chemokines. Descriptive analysis showed that most patients were adults, male, diagnosed with intermediate forms mainly (60%)...

Antimicrobial resistance in streptococcus pneumoniae: mechanisms and current epidemiology

Infections caused by Streptococcus pneumoniae are a worrisome public health problem worldwide. Young children and the elderly are the main age groups affected and the highest burden of the disease is found in developing countries. Pneumococcal infections cause 11% of the total infant deaths, representing the leading cause of child death currently preventable by vaccination. Epidemiologic information about pneumococci in Brazil is somehow restricted, but available data reinforce the worrisome occurrence of pneumococcal diseases, which are commonly treated empirically. Limitations in the diagnostic methods, along with the severity of disease contribute to this behavior. Thus, surveillance studies are crucial to define the prevalence of resistant strains both globally and in a particular region, as these strains may compromise empirical therapeutic choices. However, although different clones of penicillin non-susceptible pneumococci are internationally distributed, and considering diseases other than meningitis, the prevalence of resistance to penicillin is quite low, making this old, safe, and inexpensive drug an attractive first choice to treat pneumococcal infections. The widespread use of conjugate vaccines among children, influencing the circulation of resistant clones and the distribution of serotypes reinforces the need of surveillance studies to define the prevalence of resistance

Serology for Brucella abortus in cart horses from an urban area in Brazil / Sorologia para Brucella abortus em cavalos de carroça de área urbana do Brasil

Avaliou-se a infecção por Brucella abortus em cavalos de carroça de Curitiba e São José dos Pinhais-PR. Um total de 123 amostras foi submetido ao teste do antígeno tamponado acidificado (ATA), soroaglutinação lenta em tubos (SAL) e prova do 2-mercaptoetanol (2-ME) para confirmação dos resultados. Oito (6,5%) equinos foram positivos para o ATA e um animal permaneceu positivo ao teste confirmatório. Existem evidências da presença de brucelose entre os cavalos de carroça.

Avaliação da infecção por leptospiras patogênicas em primatas silvestres mantidos em cativeiro em Salvador, Bahia, Brasil / Evaluation of infection by pathogenic Leptospira in wild primates kept in captivity in Salvador, Bahia, Brazil

Estima-se que 70% das doenças infecciosas emergentes em humanos estão relacionados a exposição a animais silvestres. Estudos envolvendo infecções em primatas não humanos e o seu papel na epidemiologia da leptospirose são escassos.Uma instrução normativa do Ministério do Meio Ambiente(179 de 25/06/2008)recomenda o uso de teste de microaglutinação (MAT) para detecção de anticorpos aglutinantes anti-Leptospira em espécies silvestres em programas de reintrodução à vida livre. Neste contexto, o presente projeto propôs investigar a evidência de prévia exposição e a ocorrência do estado de portador de leptospira patogênicas em primatas silvestres residentes no Parque Zoobotânico Getúlio Vargas de Salvador (PZBGV) e recebidos pelo Centro de Triagem de Animais Silvestres Chico Mendes (CETAS). Foram analisados 42 amostras de soro e sangue total de 42 primatas do PZBGV e 16 amostras de soros de 16 primatas do CETAS pelo teste de aglutinação microscópica (MAT) e PCR respectivamente. Amostras de urina de 3 de primatas do PZBGV e 13 do CETAS também foram submetidas à PCR. A soroprevalência encontrada no PZGV foi de 2%(1/42)enquanto que no CETAS foi de 31%(5/16). O único primata do PZBGV positivo na MAT foi um Allouata caraya (bugio preto) fêmea, adulta, que apresentou reação mista para os sorogrupos Australis e Icterohaemorrhagiae. As cinco amostras positivas do CETAS ocorreram em macacos-prego(Cebus sp.)e foram distribuídos nos sorogrupos: Ballum(1:100), Semaranga (1:200), Grippotyphos (1:100),Cynopeteri(1:100) e uma reação mista Tarassovi / Autumnalis (1:100). Todas as amostras de sangue total e urina analisadas por PCR foram negativas. Conclui-se que a soroprevalência de anticorpos anti-Leptospira foi baixa no PZBGV de Salvador, apesar da alta frequência de roedores na área e endemicidade da leptospirose humana em Salvador. A prevalência elevada foi observada entre os animais resgatados do comércio ilegal no estado da Bahia e esta evidência sorológica de exposição sugere um risco potencial de transmissão da leptospirose ao se adotar estes primatas como animais de estimação

It is estimated that 70% of emerging infectious diseases in humans are related to exposure to wild animals. Studies involving infections in nonhuman primates and their role in the epidemiology of leptospirosis are scarce. A normative statement of the Ministry of the Environment (179 of 25/06/2008) recommends the use of microscopic agglutination test (MAT) for antibodies binding anti-Leptospira in wild species reintroduction programs in the wild. Positive tests indicate the need for quarantine and antimicrobial treatment. In this context, this project proposes to investigate the evidence of prior exposure and the occurrence of carrier status of pathogenic Leptospira in wild primates living in the Parque Vargas Zoobotânico Salvador (PZBGV) and received by the Center for Wildlife Screening Chico Mendes (CETAS). We analyzed 42 serum samples and 42 whole blood PZBGV primates and 16 sera from 16 primates CETAS by microscopic agglutination test (MAT) and PCR respectively. Urine samples of 3 primates PZBGV CETAS and 13 were also subjected to PCR. The seroprevalence in PZBGV was 2% (1/42) while the CETAS was 31% (5/16). The only positive was a primate Allouata caraya (black howler monkey) female, adult, which showed mixed reaction to serogroups Australis and Icterohaemorrhagiae. The five samples positive from CETAS occurred in monkeys (Cebus sp.) And were divided into serogroups: Ballum (1:100), Semaranga (1:200), Grippotyphosa (1:100), Cynopeteri (1:100) and mixed reaction Tarassovi / Autumnalis (1:100). All blood samples and urine samples were analyzed by PCR negative. It is concluded that the seroprevalence of anti- Leptospira antibodies was low in the Zoo of Salvador, despite the high frequency of rodents in the area and endemicity of leptospirosis in Salvador...

Serological tests for the diagnosis of active tuberculosis: relevance for India.

Diagnostic tests for active tuberculosis (TB) based on the detection of antibodies (serological tests) have been commercially available for decades, although no international guidelines have recommended their use. An estimated 1.5 million serological TB tests, mainly enzyme-linked immunosorbent assays, are performed in India alone every year, mostly in the private sector. The cost of serological tests in India is conservatively estimated at US $15 million (825 million) per year. Findings from systematic reviews on the diagnostic accuracy of serological tests for both pulmonary and extra-pulmonary TB suggest that these tests are inaccurate and imprecise. A cost-effectiveness modelling study suggests that, if used as a replacement test for sputum microscopy, serology would increase costs to the Indian TB control sector approximately 4-fold and result in fewer disability-adjusted life years averted and more false-positive diagnoses. After considering all available evidence, the World Health Organization issued a strong recommendation against the use of currently available commercial serological tests for the diagnosis of TB disease. The expanding evidence base continues to demonstrate that the harms/risks of serological tests far outweigh the benefits. Greater engagement of the private sector is needed to discontinue the use of serological tests and to replace these tests with WHO-endorsed new diagnostics in India. The recent ban on import or sale of TB serological tests by the Indian health ministry is a welcome step in the right direction.

Neosporose bovina: avaliação da transmissão vertical e fração atribuível de aborto em uma população de bovinos no Estado do Rio Grande do Sul / Bovine neosporosis: evaluation of vertical transmission and population etiological fraction of abortion in a bovine population in the State of Rio Grande do Sul, Brazil

O protozoário Nespora caninum é um parasito que causa grandes perdas reprodutivas e econômicas em bovinos no mundo inteiro. Os objetivos deste estudo foram verificar tanto a associação entre o histórico de aborto e a presença de anticorpos contra N. caninum, quanto a transmissão vertical como forma de manutenção da infecção nos rebanhos bovinos em regiões do Rio Grande do Sul, através da sorologia pareada de mães e filhas. Foi realizada amostragem de 60 propriedades distribuídas em duas regiões do Rio Grande do Sul, das quais foi coletado sangue de 40% dos animais presentes para a detecção de anticorpos anti-N. caninum por imunofluorescência indireta (IFI). Para verificar a relação aborto e soropositividade foi utilizado o teste de regressão logística univariada, e para sorologia de mães e filhas o teste de qui-quadrado de McNemar para dados pareados. Foram confrontados os dados de sorologia e aborto, sendo encontrada a frequência de 58,5% (24/41) de soropositivos quando havia histórico de aborto, e 16,4% (199/1215) dentre os sem histórico de aborto. Os animais soropositivos apresentaram um risco 7,21 (IC 95%, 3,65-14,32) vezes maior de possuir histórico de abortamento (estatística de Wald χ2=44,93, P<0,001). A fração atribuível à neosporose como causa de aborto na população em risco nas duas regiões foi estimada em 9,73% (λpop). O resultado sorológico de cada mãe foi pareado com o de sua filha e, pelo teste de qui-quadrado de McNemar (χ2=59,84, P<0,001), houve associação significativa entre as sorologias de mães e filhas, sugerindo transmissão vertical. Ressalta-se ainda a importância do acompanhamento sorológico para N. caninum, evitando assim manutenção de animais portadores que sirvam como reservatório do protozoário nas propriedades.

The protozoa Nesporora caninum is a parasite that causes great economic and reproductive losses in cattle worldwide. The objective of this study was to verify the association between abortion and the presence of antibodies against N. caninum and the vertical transmission as a means of maintaining the infection in cattle herds in Rio Grande do Sul by matching the serology of mothers and daughters. Sampling was performed in 60 dairy farms of two regions of the state, where blood was collected from 40% of the herds for the detection of anti-N. caninum by indirect immunofluorescence (IFI). To verify the association between abortion and seropositivity we used the univariate logistic regression test, and for the serology of mothers and daughters the chi-square McNemar test for paired data. In comparing serology and abortion data, a prevalence of 58.5% (24/41) among cattle with history of abortion, and 16.4% (199/1215) prevalence between those with no history of abortion was found; seropositive animals were 7.21 times more likely (95% CI, 3.65-14.32) to have previously aborted (Wald statistic χ 2=44.93, P<0.001). The fraction affected by neosporosis in the population studied was estimated as 9.73% (λpop). The serologic result of each mother was paired with her daughter and showed by the McNemar chi-square (χ2=59.84, P<0.001) significant association between the serology of mothers and daughters, suggesting vertical transmission. It is worth to note the importance of serological monitoring for N. caninu to avoid maintenance of animals that may serve as carries of the parasite reservoir on the farms.

PCR versus serology for diagnosing Mycoplasma pneumoniae infection: A systematic review & meta-analysis.

Background & objectives Diagnosis for Mycoplasma pneumoniae usually relies on serological tests. PCR technology has some advantages but also limitations. The optimal selection for these tests still needs discussion. This paper reviews the overall diagnostic accuracy of PCR versus serological assays for diagnosis of M. pneumoniae infections and to identify factors associated with heterogeneity of results. Methods: MEDLINE and Embase databases were searched. Articles meeting the selection criteria were retrieved for data collection and analysis. Studies were assessed for methodological quality using QUADAS. Hierarchial summary receiver operating characteristic (HSROC) model was used to estimate summary ROC curve. Results: Initial meta-analysis showed a summary estimate of sensitivity (SEN) 0.62 (95% CI, 0.45-0.76), and specificity (SPE) 0.96 (95% CI, 0.93-0.98). Subgroup analyses were performed to identify factors associated with heterogeneity. For different gene targets, reference standards, subjects (children or adults) and different PCR types, these aspects can generate results of heterogeneity. The 16s rDNA target and adult subjects and real-time PCR may have better test results for PCR. Interpretation & conclusions Commercial PCR tests generated consistent results with high specificity but a lower and more variable sensitivity. The findings suggest commercial PCR tests having superiorities in diagnosing M. pneumoniae infections but still cannot replace serology. PCR plus serology could be good screening tests for reliable and accurate diagnosis of M. pneumoniae.

Replacement of fetal calf serum by human serum as supplementation for human fibroblast culture / Substituição de soro bovino fetal por soro humano como suplemento para cultura de fibroblastos humanos

INTRODUCTION: Fetal calf serum (FCS) is commonly used as a supplement in the culture medium for fibroblast cells. This supplementation is far from ideal as sample quality varies from batch to batch and the composition of FCS is not completely known. In addition, FCS may be contaminated with viruses and/or prions and may also cause adverse immunologic responses in humans. Due to these facts, a worldwide effort is being made to find alternatives for xenobiotic elements in cell cultures. Human serum could be a safer alternative, especially for clinical application. METHODS: We investigated human serum as a substitute for FCS in human fibroblast culture. Fresh human serum was obtained from 10 healthy volunteers. Fibroblasts were cultivated in multiwell plates containing either Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) plus 10 percent FCS (D10) or DMEM plus 10 percent human serum (D10H). Cell counts were obtained between 24 and 264 hours of cultivation; results were expressed as the mean number of cells ± standard error of the mean to create cell proliferation curves. RESULTS: There was no statistical difference in fibroblast proliferation between the two groups. Human serum supported human fibroblast growth and proliferation, suggesting that it may be a potential substitute for FCS in human cell culture. Cells cultivated with human serum presented a different morphology, appearing smaller and more rounded as compared to cells cultivated in D10. CONCLUSIONS: These results demonstrate that human serum can be substituted for FCS in human fibroblasts culture and that fibroblasts cultivated in the presence of human serum have a morphology that is similar to in vivo fibroblasts.

INTRODUÇÃO: Soro bovino fetal (SBF) é comumente usado como suplemento no meio de cultura para cultivar fibroblastos. Essa forma de suplementação, porém, não é ideal, pois a qualidade das amostras de SBF é variada e sua composição não é completamente conhecida. Além disso, o SBF pode apresentar contaminação por vírus e príons ou causar complicações imunológicas. Assim, a comunidade científica tem buscado alternativas ao uso de elementos xenobióticos em cultura celular. O soro humano pode ser uma dessas alternativas, principalmente para aplicação clínica. MÉTODO: Soro humano, obtido de sangue de 10 voluntários saudáveis submetidos a avaliação sorológica prévia, foi testado como substituto do SBF em cultura de fibroblastos humanos. As células foram cultivadas em placas multipoços, contendo Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) mais 10 por cento de SBF (D10) ou DMEM mais 10 por cento de sroro humano (D10H). Entre 24 e 264 horas de exposição aos meios testados, as células foram contadas e os resultados foram expressos em média ± erro padrão da média, para obtenção de curvas de proliferação celular. RESULTADOS: Não houve diferença estatística entre os grupos de proliferação. Fibroblastos na presença de soro humano aparentavam ser menores e mais arredondados em comparação àqueles mantidos em D10. CONCLUSÕES: Os resultados permitem inferir que o soro humano pode substituir o SBF em cultura de fibroblastos e que fibroblastos cultivados em meio suplementado por soro humano apresentam morfologia mais semelhante àqueles in vivo.

Detecção de anticorpos anti-Neospora caninum em amostras individuais e coletivas de leite de bovinos pela reação de imunofluorescência indireta / Detection of antibodies against Neospora caninum in individual and bulk milk samples from cattle by the technique of indirect immunofluorescence assay

Neospora caninum is a major causative agent of reproductive losses in cattle and the diagnosis of neosporosis is essential for control and eradication programs. Therefore, this study aimed to: (1) standardize an indirect immunofluorescence assay (IFAT) for detection of antibodies against N. caninum in bovine milk, starting from a standard IFAT used for blood serum samples; (2) check the agreement between antibodies detection by IFAT in blood serum and in milk of cows; (3) evaluate the suitability of IFAT for detection of anti-N. caninum antibodies in bulk milk samples. We tested samples of blood serum and milk collected from 112 lactating cows for detection of antibodies against N. caninum, furthermore, six bulk milk samples, each one corresponding to each dairy farm studied. Agreement between the detection of antibodies in blood serum (with antibody titer >50) and in milk, with 90 percent of sensitivity and 100 percent of specificity for the IFAT in milk samples were found in 78 percent of the animals. However, for cows with antibody titers >100 in blood serum, the agreement, the sensitivity and the specificity of the IFAT in milk were of 100 percent. It is shown that, considering the dairy farm conditions. The most appropriate diagnostic approach to be adopted regarding the collection of blood serum or milk can elect for search anti-N. caninum antibodies by IFAT. Moreover, detection of antibodies in bulk milk samples can serve for diagnosis and screening of herds with infected animals.

Neospora caninum é um agente envolvido em perdas reprodutivas em bovinos. O diagnóstico dessa infecção é de grande importância, principalmente para programas de erradicação e controle. Sendo assim, os objetivos deste estudo foram: (1) adaptar uma reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para detecção de anticorpos anti-N. caninum no leite, a partir de uma RIFI padronizada para a detecção desses anticorpos no soro sanguíneo, (2) analisar a concordância entre a detecção desses anticorpos pela RIFI no soro sanguíneo e no leite de fêmeas bovinas, (3) avaliar a viabilidade da RIFI para a detecção de anticorpos anti-N. caninum em amostras coletivas de leite. Foram testadas amostras de soro sanguíneo e de leite, coletadas de 112 vacas em lactação, e seis amostras coletivas de leite, correspondentes a cada uma das propriedades avaliadas. Encontrou-se 78 por cento de concordância entre a detecção de anticorpos no soro sanguíneo (com título de anticorpos >50) e no leite, com sensibilidade de 90 por cento e especificidade de 100 por cento para a RIFI nas amostras de leite. Entretanto, para as vacas com títulos de anticorpos >100 no soro sanguíneo, tanto a concordância como os valores de sensibilidade e especificidade da RIFI no leite foram de 100 por cento. Todas as amostras coletivas de leite foram positivas na RIFI. Isso demonstra que, conforme a propriedade pode-se eleger com segurança qual a melhor abordagem diagnóstica a ser adotada em relação à coleta de soro sanguíneo ou de leite para a pesquisa de N. caninum pela RIFI. Além disso, a determinação da presença de anticorpos em amostras coletivas de leite pode servir para diagnóstico e triagem de rebanhos com animais infectados.

Infecção rickettsial em Cerro Largo, Rio Grande do Sul / Rickettsial infection in Cerro Largo, State of Rio Grande do Sul, Brazil

O presente estudo teve por objetivo avaliar, por imunofluorescência indireta, infecções ricketsiais em animais e humanos assintomáticos da área rural de Cerro Largo, RS. Dezesseis (51.6%) equinos, seis (22.3%) cães e oito (29.6%) humanos mostraram anticorpos reagentes (título <64) para Ricksettia rickettsii e para Ricksettia parkeri. Os estudos sorológicos indicaram que equinos, cães e humanos entraram em contato com rickettsias do grupo da febre maculosa nesse município. Dois cães mostraram títulos de R. parkeri no mínimo quatro vezes maior que os demais agentes ricketsiais testados e sugerindo que R. parkeri ou um genótipo próximo está circulando na região.

Aplicação de técnica sorológicas e moleculares na detecção de leishmania em doadores de sangue na cidade de Salvador, Bahia / Application of serological and molecular technique in the detection of Leishmania in blood donors in Salvador, Bahia

A leishmaniose é causada por protozoários do gênero Leishmania e constitui um problema grave de saúde pública na Bahia. A transmissão do protozoário pela transfusão de sangue já foi relatada e existe a possibilidade dos hemoderivados serem um potencial risco para a manutenção da doença. O presente trabalho teve como objetivo avaliar positividade sorológica contra Leishmania e a presença deste parasita no sangue periférico de doadores, na cidade de Salvador, BA. Para estipulando a soroprevalência de leishmaniose em doadores de sangue, foram coletadas amostras de sangue periférico de 700 indivíduos, no Hemocentro da Bahia (HEMOBA/SESAB), de janeiro a setembro de 2010. As amostras foram processadas para a obtenção de plasma e de DNA. A sorologia anti-Leishmania foi feita por ELISA, empregando antígeno solúvel de Leishmania chagasi (SLA). A presença de parasitas foi determinada por PCR qualitativo e por PCR quantitativo (qPCR). A população amostral foi composta por 74.5% de indivíduos masculinos, com média de idade de 34 anos. A partir de uma curva ROC, empregando soros de pacientes com leishmaniose visceral e soros de pacientes residentes em área não endêmica, o ponto de corte para o teste sorológico foi estabelecido em 0,0167 (DO em 405nm). A sorologia anti-Leishmania foi positiva em 5.4% (38/700) das amostras. Destes indivíduos, 73% (28/38) apresentaram amplificação para uma região repetitiva do genoma de Leishmania, empregando-se o PCR qualitativo. Empregando o qPCR, foi possível determinar a presença de parasitas em 0.4% (3/700) amostras e, nestas, a quantificação foi inferior a 10 parasitas. Nossos resultados mostram a prevalência de sorologia anti-Leishmania é de 5.4%, em doadores do HEMOBA/SESAB, similar ao encontrado em outras área onde ocorre a leishmania.

Inquérito sorológico de Toxoplasma gondii em ovinos na microrregião Castanhal, Pará, Brasil / Serologic inquiry of Toxoplasma gondii in sheep in northern Brazil

A toxoplasmose é uma grave zoonose e uma das mais difundidas doenças parasitárias. Um inquérito sorológico realizado nos municípios de Santo Antônio do Tauá e Santa Izabel do Pará, Microrregião Castanhal do Estado do Pará, demonstrou uma elevada frequência (44,29%) de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em amostras de soros de ovinos detectados pelo teste de hemaglutinação indireta, com a seguinte distribuição nos títulos 1:64, 1:128, 1:256, 1:512, 1:1024 e 1:2048, respectivamente: 50 (32,26%), 42 (27,10%), 29 (18,70), 11 (7,10%), 12 (7,74%) e 11(7,10%). Diferença estatística significativa foi observada entre as faixas etárias 0 a 2 e > 2 anos em ambos os sexos (?2 = 13,42, p = 0,0002) com maior freqüência, (58,71%), na faixa etária > 2 anos (58,71%), entre os sexos (?2 = 23,51, p = 0,0001), com maior freqüência de sororreagentes nas fêmeas (72,26%). Embora os municípios tenham apresentado freqüências semelhantes (49,33%, para Santa Izabel do Pará e 40,50% para Santo Antonio do Tauá), não foi observada associação entre eles (?2 = 2,71, p = 0,09). Medidas e ações de vigilância sanitária são recomendadas para prevenir riscos aos rebanhos e às populações humanas.

Toxoplasmosis is a serious zoonosis and widespread parasitic disease. A serologic inquiry in Santo Antonio do Tauá and Santa Izabel do Pará counties in the Castanhal Microregion, state of Pará, Northern Brazil, demonstratedahighfrequency,(44.29%) ofanti-Toxoplasmagondii antibodies detected by indirect hemaglutination test, with a distribution at titers 1:64, 1:128, 1:256, 1:512, 1:1024 and 1:2048 of, respectively, 50 (32.26%), 42 (27.10%), 29 (18.70%), 11 (7.10%), 12 (7.74%) and 11(7.10%). A statistically significant difference was observed between the 0 up to 2 and > 2 age groups in both sexes (?2 = 13.42, p = 0.0002) with a greater frequency in the > 2 years age group, (58.71%), and between the sexes (?2 = 23.51, p = 0.0001) with a greater frequency in females, (72.26%). Although the two counties presented similar frequencies (49.33% and 40.50% for Santa Izabel do Pará and Santo Antonio do Tauá, respectively) no association was observed between them. Sanitary surveillance measures are recommended to prevent health risks to humans and animals.

Levantamento sorológico de Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis em bovinos leiteiros no estado do Espírito Santo / Serological survey of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in dairy cattle in Espírito Santo state

The occurrence of antibodies to Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) was verified in dairy cattle from Espírito Santo state. A total of 1,450 serum samples were analyzed for antibodies anti-MAP, using ELISA. Dairy cattle, males and females, from four regions of Espírito Santo state were used. One hundred sixty-five (11.4 percent) samples were positive for anti-MAP, 33 (2.3 percent) were considered suspicious, and 1,252 (86.3 percent) were negative. In all regions, seropositive animals were found, indicating that the agent is spread by the State, posing a threat to the local dairy farming and neighboring states, as well as public health, since MAP can be involved with Crohn's disease in humans. This result presents the first serologic anti-MAP survey in dairy cattle of Espírito Santo State.